③应用：可用于鉴别二氢黄酮类、二氢黄酮醇类和其他黄酮类化合物。

　　2.与金属盐类试剂的络合反应

　　黄酮类化合物分子中若具有3-羟基、4-羰基或5-羟基、4-羰基或邻二酚羟基等结构，则可以与许多金属盐类试剂如铝盐、锆盐、锶盐等反应，生成有色的络合物或有色沉淀，有的还产生荧光。

　　（1）三氯化铝反应

　　①方法：此反应可在滤纸、薄层上或试管中进行。

　　②现象：生成的络合物多呈黄色，置紫外灯下显鲜黄色荧光，但4′-羟基黄酮醇或7，4′-二羟基黄酮醇显天蓝色荧光。

　　（2）锆盐-枸橼酸反应

　　①应用：利用此反应鉴别黄酮类化合物分子中3-或5-OH的存在与否。

　　②方法：是取样品0.5～1mg，用甲醇10ml溶解，加2%二氯氧锆甲醇溶液1ml，若出现黄色，说明3-OH或5-OH与锆盐生成了络合物。继之再加入2%枸橼酸甲醇溶液，如黄色不减褪，示有3-OH或3，5-二OH；如果黄色显著减褪，示无3-OH，但有5-OH。

　　③原理：因为5-羟基、4-羰基与锆盐生成的络合物没有3-羟基、4-羰基锆络合物稳定。容易被弱酸分解。

　　此反应也可在滤纸上进行，得到的锆盐络合物斑点多呈黄绿色并有荧光。

　　（3）氨性氯化锶反应

　　黄酮类化合物的分子中如果有邻二酚羟基，则可与氨性氯化锶试剂反应，如产生绿色至棕色乃至黑色沉淀，则表示有邻二酚羟基。

　　（4）三氯化铁反应

　　多数黄酮类化合物分子中含有酚羟基，能与三氯化铁水溶液或醇溶液发生显色反应，可呈现紫、绿、蓝等不同颜色。

　　3.碱性试剂反应

　　①现象：黄酮类化合物与碱性溶液可生成黄色、橙色或红色等。

　　②应用：对于鉴别黄酮类化合物的结构类型有一定意义。还可帮助鉴别分子中某些结构特征。

　　4.硼酸显色反应

　　5-羟基黄酮、6′-羟基查耳酮类化合物在无机酸或有机酸存在条件下，可与硼酸反应，产生亮黄色。

　　①一般在草酸存在下显黄色并具有绿色荧光。

　　②在枸橼酸丙酮存在的条件下，则只显黄色而无荧光。

　　5.五氯化锑反应

　　①方法：样品的无水四氯化碳溶液，加2%五氯化锑的四氯化碳溶液，若为查耳酮类则生成红色或紫红色沉淀，而黄酮、二氢黄酮及黄酮醇类显黄色至橙色，

　　②应用：查耳酮类与其他黄酮类化合物。

　　6.其他显色反应

　　①应用：Gibb′s反应也可用于鉴别黄酮类化合物酚羟基对位是否被取代。 ②方法：将样品溶于吡啶中，酚羟基对位未被取代者在加入Gibb′s试剂后即显蓝色或蓝绿色。

　　显色总结：

　　①HCl-Mg：多数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮及二氢黄酮醇类化合物显红～紫红色；

　　②四氢硼钠还原反应：二氢黄酮类化合物专属性较高；

　　③锆盐-枸橼酸反应：3-OH，5-OH；

　　④氨性氯化锶反应：邻二酚羟基；

　　⑤五氯化锑：查耳酮。

　　三、提取分离

　　（一）提取

　　与溶解性、酸碱性等性质有关

　　1.乙醇或甲醇提取法

　　（1）游离黄酮：高浓度：90%。

　　（2）黄酮苷：低浓度：60%。

　　（3）提取方法：冷浸法，回流提取法，渗漉法等。

　　2.热水提取法

　　（1）范围：黄酮苷，如芦丁，黄芩苷等。

　　（2）优点：成本低，无污染，适合工业化生产。

　　3.碱性水或碱性稀醇提取法

　　（1）依据：酸性、酚羟基

　　（2）一般操作方法：碱溶酸沉法。

　　（3）常用溶剂：稀氢氧化钠溶液和石灰水。

　　①稀氢氧化钠溶液：浸出能力大，但提取出的杂质也多。

　　②石灰水（氢氧化钙水溶液）：含有多羟基的鞣质，或含有羧基的果胶、黏液质等水溶性杂质生成钙盐沉淀，不被溶出，有利于浸出液的纯化；其缺点是浸出效果可能不如稀氢氧化钠水溶液，且有些黄酮类化合物能与钙结合成不溶性物质，不被溶出。