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10年初级检验技士考试考前辅导:超敏反应的主要免疫学检测

www.zige365.com 2010-1-19 17:40:19 点击:发送给好友 和学友门交流一下 收藏到我的会员中心

  2.酶联免疫测定法:测定血清IgE时也常用双抗体夹心ELISA法,操作方便,敏感性也很高,在临床上经常应用。

  3.间接血凝试验:用抗IgE致敏红细胞,将标本血清做系列稀释后与致敏红细胞反应。此法更加简便易行,便于普及,但敏感性比上两法稍低。

  4.化学发光法:用化学发光物质标记抗IgE,与血清中的IgE反应后,通过化学发光分析,计算出IgE含量。此法敏感性特异性均较好。

  (二)特异性IgE的测定

  过敏患者的血清中存在着具有变应原特异性的IgE称之为特异性IgE,如对牛奶过敏者则有针对牛奶变应原的IgE;对蒿草花粉过敏者,则有针对该花粉的IgE,该抗体只能与该变应原特异性结合。因此需要用纯化的变应原代替抗IgE进行检测。

  sIgE检测方法有许多种,目前临床上常用的有ELISA,FEIA,免疫印迹等。随着sIgE测定技术的完善,此项测定已日趋商品化,开发了各种检测系统,如CAP过敏原检测系统,Master过敏原检测系统,Px过敏原检测系统等,这些测定系统包括了仪器、试剂、计算机软件处理系统。国内目前应用最多的是CAP检测系统。

  1.放射变应原吸附试验(RAST):将纯化的变应原与固相载体结合,加入待检血清及参考对照,再与同位素标记的抗IgE抗体反应,然后测定固相的放射活性,通过标准曲线求出待检血清中特异性IgE的含量,或在标本放射活性高于正常人均数加3s时判为阳性。

  2.酶联免疫测定法试验:原理及步骤基本同RAST,仅是最后加入酶标记的抗IgE,利用酶底物进行显色。测定结果的表示也与RAST相同。

  3.CAP检测系统:CAP,一个很小的塑料帽状物,其内置有多孔性、弹性和亲水性的纤维素粒,此粒多孔,吸咐了更多的变应原,加人血清,血清中的sIgE就会和变应原结合,再加入酶标抗人IgE,再加入荧光显色系统,在荧光分光光度计上测定荧光强度,计算机提供相应软件,自动计算出结果。报告sIgE含量。

  (三)临床意义

  1.血清总IgE:血清总IgE水平一般用国际单位(IU)或ng表示,1IU=2.4ng,相当于WH0标准冻干血清制剂0.00928mg内所含的IgE量。正常人群IgE水平受环境、种族、遗传、年龄、检测方法及取样标准等因素的影响,以致各家报道的正常值相差甚远。婴儿脐带血IgE水平小于0.5IU/ml,出生后随年龄增长而逐渐升高,12岁时达成人水平。成人血清IgE水平约在20~200IU/ml之间,一般认为大于333IU/ml(800ng/ml)时为异常升高。

  与IgE升高相关的常见疾病有:过敏性哮喘、季节性过敏性鼻炎、特应性皮炎、药物性间质性肺炎、支气管肺曲菌病、麻风、类天疱疮及某些寄生虫感染等。上述疾病时IgE升高的程度并不一致,在过敏性支气管肺曲菌病时最为显著,其值可达5000~20000ng/ml,除了此病和特应性皮炎以及在花粉季节之外,任何血清总IgE水平大于5000ng/ml的患者均应考虑寄生虫感染的可能性。

  2.特异性IgE:slgE测定是体外检测变应原的重要手段。主要用于Ⅰ型超敏反应的诊断。其试验的灵敏度及特异性都很高、特别是对花粉、螨类、宠物皮屑、牛奶、鸡蛋、坚果等变应原的sIgE测定,灵敏度和特异性都在90%以上,有的甚至接近l00%.根据sIgE含量可确定患者变应原种类,可评价患者过敏状态,脱敏治疗的疗效,对哮喘的诊断和鉴别诊断有重要帮助。

  RAST(放射变应原吸附试验)是目前公认的检测Ⅰ型变态反应的有效方法之一,具有特异性强、敏感性高、影响因素少、对患者绝对安全等优点;不但有助于过敏性哮喘的诊断,对寻找变应原也有重要价值。RAST与皮肤试验和支气管激发试验的符合率在80%左右,但不能完全代替后两种试验,因为活体试验还能反映嗜碱性粒细胞和靶细胞的反应性。

  但是RAST也有许多缺点:费用昂贵、花费时间长、放射性同位素易过期而且污染环境、不同来源试剂盒的参比血清不同而不易相互比较、待检血清含有相同特异性IgG时可干扰正常结果。目前国内应用较少。

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