一、中药有效成分的提取方法
提取分离是研究中药化学成分的基础,根据被提取成分具体理化性质、极性、酸碱性、有无特殊结构,进行具体的选择。
(一)溶剂提取法
1.溶剂选择
(1)溶剂按极性分类:三类,即亲脂性有机溶剂、亲水性有机溶剂和水。常用于中药成分提取的溶剂按极性由弱到强的顺序如下:
石油醚<四氯化碳<苯<二氯甲烷<氯仿<乙醚<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<甲醇(乙醇)<水。
(2)溶剂选择要点:中药化学成分中,萜、甾等大环、稠环化合物极性小,易溶于氯仿、医.学教育网搜集整理乙醚等;糖、苷等易溶于水、乙醇等极性溶剂中;酸碱性成分因存在状态不同溶解性不同。
(3)常用溶剂特点:
①水:为价廉、易得、使用安全的强极性溶剂。适于提取无机盐、糖、氨基酸、蛋白质、有机酸盐、生物碱盐、苷类等。
②亲水性有机溶剂:以乙醇最常用。高浓度提取亲脂性成分,低浓度提取亲水性成分。
③亲脂性有机溶剂:石油醚、苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯。
具有较强的选择性,对挥发油、油脂、叶绿素、树脂、内酯、某些生物碱及一些苷元均可提取出来。优缺点:沸点低,浓缩回收方便,但易燃、有毒、价贵,穿透力差。
2.提取方法
(1)煎煮法:溶剂:水,缺点:以水为提取溶剂,故对亲脂性成分提取不完全,且含挥发性成分及加热易破坏的成分不宜使用。多糖类成分含量较高的中药,用水煎煮后药液黏度较大,过滤困难。
(2)浸渍法:以水或稀醇反复提取,优点:不用加热,适用于遇热易破坏或挥发性成分,含淀粉或黏液质多的成分适用;缺点:提取时间长,效率不高。
(3)渗漉法:以稀乙醇或酸水作溶剂,先浸后渗,不需加热,提取效率高于浸渍法。
(4)回流提取法:以有机溶剂为提取溶剂,在回流装置中加热进行。一般多采用反复回流法。优点:提取效率高,但受热易破坏的成分不宜用。
(5)连续回流提取法:有机溶剂,索氏提取器或连续回流装置,优点:提取效率高、节省溶剂;缺点:影响因素多、工业化生产是需优化。
(二)水蒸气蒸馏法
使用范围:适于具有挥发性,能随水蒸气蒸馏而不被破坏的有效成分的提取。挥发油、小分子生物碱、酚类、游离醌类等。
二、中药有效成分的分离
常用分离方法:溶剂法、沉淀法、结晶法、色谱分离法
(一)溶剂法
1.酸碱溶剂法:混合物中各组分的酸碱性不同进行分离
(1)酸溶:有机碱性成分可与无机酸成盐而溶于水。
(2)碱溶:具有羧基,用碳酸氢钠;具有酚羟基,用氢氧化钠;具有内酯或内酰胺结构的成分可被皂化而溶于水。
使用注意:酸碱的强度、加热温度、与被分离成分接触的时间等。
2.溶剂分配法
原理:利用混合物中各成分在互不相溶的两相溶剂中分配系数不同而达到分离的方法。
成分在两相溶剂中分配系数相差越大,则分离效率越高。一般采用少量多次分配医.学教育网搜集整理提高萃取效率。需要注意的是防止乳化。
(1)系统溶剂萃取法:常用于中药化学成分的初步分离漏斗
(2)连续液-液萃取装置
(3)液滴逆流层析法
(二)沉淀法
原理:基于有些中药化学成分能与某些试剂生成沉淀,或加入某些试剂后可降低某些成分在溶液中的溶解度而自溶液中析出的一种方法。
1.专属试剂沉淀法:例如:雷氏铵盐沉淀季铵碱、胆甾醇沉淀甾体皂苷;明胶沉淀鞣质。
2.分级沉淀法:改变加入溶剂的极性或数量使沉淀逐步析出的方法。多糖、蛋白质等。
3.盐析法:在混合物水溶液中加入易溶于水的无机盐,最常用的是氯化钠,至一定浓度或饱和状态,使某些中药成分在水中溶解度降低而析出,或用有机溶剂萃取出来。