有关补体测定的试验
(1)补体总活性测定
①原理:补体最主要的活性是溶细胞作用。补体溶血程度与补体的活性相关,但非直线关系。溶血反应对补体的剂量依赖呈一特殊的S形曲线。实验常以50%溶血作为终点指标,它比100%溶血更为敏感,这一方法称为补体50%溶血实验即CH50。
②检测试剂有:绵羊红细胞;溶血素;稀释缓冲液
③方法评价:CH50试验是测定经典途径总补体溶血活性,所反映的是补体9种成分的综合水平。方法简便、快速,但敏感性较低。
④临床意义:如果测定值过低或者完全无活性,首先考虑补体缺陷,可分别检测C4、C2、C3和C5等成分的含量。
(2)补体结合试验:
补体结合试验是用免疫溶血机制做指示系统,来检测另一反应系统抗原或抗体的试验。早年就将其应用于梅毒的诊断,即著名的华氏反应。
①补体结合试验原理、类型:补体结合试验中有5种成分参与反应,分属3个系统:反应系统;补体系统;指示系统。其中反应系统与指示系统争夺补体系统。补体结合试验可用已知抗原来检测相应抗体,或用已知抗体来检测相应抗原。
②临床应用:传染病诊断,病原性抗原及相应抗体的检测;其他抗原的检测,如肿瘤相关抗原、血液中的蛋白质鉴定,HLA分型等;自身抗体的检测等。
(3)单个补体成分测定(熟悉):主要检测C3、C4、C1q、B因子和C1酯酶抑制物。
①免疫溶血法:溶血法主要根据抗原与其特异性抗体(IgG、IgM型)结合后可激活补体的经典途径,导致细胞溶解。
②免疫化学法:分为单向免疫扩散法、火箭免疫电泳、透射比浊法和散射比浊法。前两种方法已逐渐趋于淘汰,后两种方法通过仪器对补体的C3、C4、B因子等单个成分进行测定。