(4)结果:培养基变为黑色为阳性,不变色者为阴性。
(5)应用:主要用于D群链球菌与其他链球菌的鉴别,前者阳性,后者阴性。也可用于革兰阴性杆菌及厌氧菌的鉴别。
5.甲基红试验
(1)原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸可进一步分解,产生甲酸、乙酸、乳酸等,使培养基的pH降至4.5以下,当加入甲基红试剂则呈红色,为甲基红试验阳性。若细菌分解葡萄糖产酸量少,或产生的酸进一步转化为其他物质(如醇、酮、醚、气体和水等),则培养基的酸度仍在pH6.2以上,故加入甲基红指示剂呈黄色,是为阴性。
(2)培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。
(3)方法:将待检菌接种于上述培养基中,培养2~4d,于培养基内加入甲基红试剂,立即观察结果。 (4)结果:呈现红色为阳性;橘红色为弱阳性;黄色为阴性。
(5)应用:主要用于鉴别大肠埃希菌与产气肠杆菌,前者为阳性,后者为阴性。此外肠杆菌科中沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属、变形杆菌属等为阳性,而肠杆菌属、哈夫尼亚菌属则为阴性。
6.V-P试验
(1)原理:某些细菌在糖代谢过程中,分解葡萄糖产生丙酮酸,丙酮酸脱羧产生乙酰甲基甲醇,乙酰甲基甲醇在碱性环境中,被空气中的氧氧化为二乙酰,进而与培养基内蛋白胨中精氨酸所含的胍基起作用,生成红色化合物,则为V-P试验阳性。若培养基中胍基含量较少,则可加入少量含胍基化合物,如肌酸或肌酐等。试验时加入a-萘酚可加速此反应。
(2)培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。
(3)方法:将待检菌接种于上述培养基中,于35℃培养48h后加入甲液(6% α-萘酚酒精溶液)和乙液(40% KOH溶液),振摇。
(4)结果:在数分钟内出现红色为阳性;如无红色出现且于35℃4h后仍如故者即为阴性。
(5)应用:本试验常与甲基红试验一起使用,因为前者阳性的细菌,后者通常为阴性。
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