白细胞计数原理:
1.实验原理:用稀乙酸将血液稀释并破坏红细胞,混匀后,滴入计数盘中,在显微镜下计数一定范围内的白细胞数,经换算求得每升血液中白细胞总数。
2 方法学评价 显微镜记数法 血液分析仪记数法
3 质量控制
1)经验控制
2)计数误差 技术误差 固有误差 有核红细胞影响
3)质量控制
a.常规考核标准(RCS)评价:适用于室内质控
RCS= ×100%
白细胞≤4×109/L者,RCS<30%;白细胞在(4.1-14.9)×109/L者,RCS<20%;白细胞≥15×109/L者,RCS<15%;超过上述标准者为不合格
b.变异系数评价法:30人上技术考核。
c.两差比值评价法:个人技术考核。
4 参考值
成 人:(4-10)×109/L
新 生 儿: (15-20)×109/L
6月- 2岁:(11-12)×109/L
5 临床意义 与中性粒细胞的临床意义一致
白细胞增;白细胞减低
6 操作方法 了解(熟练掌握)
1) 显微镜记数法
实验试剂:
白细胞稀释液:2%冰乙酸溶液中加入10g/L亚甲蓝3滴。
实验器材:同红细胞计数
实验操作
a.加白细胞稀释液0.38ml于一小试管中;
b.用微量吸管吸取20ul末梢血。
c.擦去微量吸管外余血,将其插入稀释液底部,轻轻将血放出,并吸取上
清液洗涤微量吸管3次,混匀。
d.用微量吸管或玻璃棒取混匀的细胞悬液1滴,充入计数池与盖片的缝隙
中,静置2-3min,使白细胞下沉。
e.低倍镜计数四角4个大方格内白细胞总数。
结果计算
X/4×10×20×106/L=白细胞/L
公式中:在法定计量单位制中用N×109/L表示。
X:为4个大方格内白细胞总数。
÷4:为每大方格(即0.1ul)内白细胞平均数。
×10:1个大方格的容积为0.1ul,换算成1ul。
×20:血液的稀释倍数。
×106:将ul换算成L。
2)注意事项
⊙采血时不能挤压过度,因此针刺深度必须适当。
⊙在大方格内压线细胞应按计数原则计数。
⊙稀释液要过滤,实验器材须清洁,以免杂质微粒影响。
⊙充池前的摇匀要注意,气泡不能太多。
⊙加盖玻片方式:“推式”,不要“盖式”。
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