10.2加5μlCD41抗体和5μlCD61抗体染液,在室温18℃~22℃、避光条件下放置15分钟。
10.315分钟后,加4.85mlPBS-BSA稀释液制备成1:1000的稀释标本,轻轻颠倒混匀以保证PLT和RBC充分混匀。
10.4用流式细胞仪检测时,应至少检测5000个信号,其中PLT应多于1000.流式细胞仪的设定必须保证每秒计数少于3000个信号。如果同时收集到RBC散射光的信号和血小板的荧光信号应被视为RBC-PLT重叠,计数结果将被分别计入RBC和PLT.
直方图或点图均可被采用,但推荐使用点图。检测过程中推荐使用正向置换移液器。
11、RBC浓度的计数法
据中华人民共和国卫生行业标准WS/TXXX-2003:红细胞和白细胞计数的参考方法。
12、血小板计数值的确定
使用流式细胞仪确定RBC/PLT的比值
R=RBC/PLT
用RBC数除以R值得到PLT计数值
13、重叠
一旦设定了理想的检测条件,则不须再次进行重叠计数的校准。
14不精密度
血小板检测结果的不精密度(CV)要求≤3%。
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