肥达氏反应操作规程：

　　[实验原理]

　　本法是以伤寒"O"，"H";甲，乙，丙副伤寒分别培育，经甲醛处理杀死后，做成菌液供 肥达氏应用，用以伤寒的辅助诊断。

　　[操作方法]

　　1、 取康氏试管，排成5 × 7形式，5 排分别编成O，H，A，B，C;

　　2、 另取大试管一支，加入病人血清0.25ml，用4.75ml生理盐水作1：20稀释，取2.5ml该稀释血清于每排第一管内分别注入0.5ml;

　　3、再取2.5ml生理盐水把大试管内血清作2 倍稀释， 取2.5ml该稀释血清于每排第二管内分别注入0.5ml，以此类推 ， 每排最后一管加0.5ml生理盐水作阴性对照， 各稀释度：1/20，1/40，1/80，1/160，1/320.然后于前六管中逐管加入1：10稀释的各菌液0.5ml， 各终稀释度：1/40，1/80，1/160，1/320，1/640.

　　4、充分振荡混匀，于37℃放置16-20小时判定结果。

　　[结果判定]

　　根据凝集反应的强弱和有无，分别以4+，3+，2+，1+，-，记录，以呈现(2+)的血清最高稀释度为终点效价。

　　4+：液体清澈透明，菌体全部被凝成块，沉于管底。

　　3+：液体较透明，大部分菌体被凝集而沉于管底。

　　2+：液体稍透明，管底有少量凝集沉淀物。

　　1+：液体较混浊，可见极少量凝集物。

　　-：液体混浊，细菌因重力下降于管底呈边缘光滑圆点(与对照管相似)。

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