一、综合安全等级评价方法概述
综合安全等级评价方法是对水产苗种检疫内容中感官要求、寄生虫性疾病和细菌性疾病的检疫结果进行判定的方法。主要运用模糊数学的基本理论,将各隶属项进行模糊量化,按三种检测结果分别赋予1、2、4的分值,然后将各隶属项的分值进行相加,计算出系统综合评分,根据系统综合评分的分值来判断系统的综合安全等级。
二、水产苗种检疫结果评分标准
1、感官要求共包含五项指标:
a、活力 b、感光能力 c、体表光洁度 d、伤残、畸形率 e、死亡率
各项指标的判定结果
感官要求
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活力
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感光能力
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体表
光洁度
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伤残畸形率
(≤3%)
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死亡率
(≤3%)
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判定结果
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强
不强
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敏感
不敏感
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干净
不干净
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正常
不正常
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正常
不正常
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感官要求评分标准:
①五项指标中全部指标符合要求或仅有一项指标未符合要求,则将其评分结果记为1;
②五项指标中其中有两项或三项指标未符合要求,则将其评分结果记为2;
③五项指标中其中有四项或全部指标未符合要求,则将其评分结果记为4。
2、寄生虫检测包括对寄生虫数量的判定及其优势种类别的鉴定,评分标准为:
①组织内(外)偶见寄生虫,则将其评分结果记为1;
②组织内(外)容易发现寄生虫,但寄生虫数量较少,则将其评分结果记为2;
③组织内(外)极易发现寄生虫,且寄生虫数量很多,则将其评分结果记为4;
3、细菌检测包括对弧菌数量的测定及其优势菌种类的鉴定,以下为弧菌总数标准化检测程序及评分标准:
(1)弧菌总数标准化检测程序
①样本处理:
将初样(混合样)放入初样管中,用无菌扦样器捣碎样本制成实验样本。
②母液及稀释液的制备:
用扦样器扦取0.5g(0.5ml)实验样本于母液管(内含4.5ml Nacl溶液)中,制成母液,并振荡混匀,此时母液管浓度级别为10-1。
用微量移液器吸取母液管中的液体0.5ml,注入A管(内含4.5ml Nacl溶液)配成浓度级别为10-2的稀释液,并振荡混匀。
以此类推,制成B管10-3稀释液和C管10-4的稀释液。
③细菌接种及培养:
用无菌微量移液器分别吸取ABC管中的稀释液,向特定选择性培养基TCBS上滴1滴溶液(0.05ml),并做平行对照组,微微摇晃使液体尽量散开,待液体完全被培养及吸收后,放于25-28℃倒置培养36-48小时后取出计数。
④细菌总数计数及计算均值
无论细菌菌落大小均要求计数,经计算得每个浓度的计数平均值分别用ABC来表示。
⑤结果判定原则:
a、首先选择平均菌落在20~200之间的数值作为检测结果,如果只有一项数值介于20~200之间,则选择该数值为最终结果,即若A属于[20,200],BC不属于[20,200],则A为最终结果;
b、如果有两项数值介于20~200之间,则按以下原则:
AB属于[20~200],C小于20,则选B为最终结果;
BC属于[20,200],A大于200,则选C为最终结果。
c、如果ABC均大于200,则选C为最终结果,如果ABC均小于20,则选A为最终结果。
d、可以接受的结果:
如果AB大于200,C小于20或A大于200,BC小于20,此两种结果可由多种原因导致,需比较实验组和对照平行组来判定是否属于上述几种情况,如果认为结果不能更改,则可选择B为最终结果,B为可接受结果。
e、如果除了上述的这些情况外,还出现了其它的结果,则说明实验过程中存在严重的错误,应当重新实验。
(2)评分标准:
①弧菌总数计数的最终结果若选择A为最终检测结果的记为1;
②弧菌总数计数的最终结果若选择B为最终检测结果的记为2;
③弧菌总数计数的最终结果若选择C为最终检测结果的记为4;
三、安全等级的划分
安全等级分成五个等级,具体如下: